ISOLASI DAN KARAKTERISASI ENZIM β-GALAKTOSIDASE DARI ISOLAT BAKTERI TERMOFILIK SUMBER AIR PANAS GEDONG SONGO

Abstract

Enzim β-galaktosidase merupakan enzim yang dapat mengubah laktosa menjadi glukosa dan galaktosa. Berdasarkan uji kualitatif yang telah dilakukan oleh Suprapti menyatakan bahwa isolat bakteri termofilik sumber air panas Gedong Songo berpotensi menghasilkan enzim β-galaktosidase. Penelitian ini bertujuan untuk memperoleh enzim β-galaktosidase dari isolat bakteri termofilik sumber air panas Gedong Songo, memperoleh karakter enzim dan menentukan aktivitas spesifik enzim β-galaktosidase pada kondisi optimumnya. Isolasi bakteri menggunakan media ½ Luria Berthani (½ LB). Jenis bakteri diidentifikasi dengan metode pewarnaan Gram. Enzim β-galaktosidase diproduksi pada media ½ LB selama 6 jam dengan menggunakan laktosa sebagai penginduksi. Enzim β-galaktosidase diisolasi dengan metode ekstraksi, fraksinasi amonium sulfat bertingkat dan dialisis. Uji aktivitas enzim β-galaktosidase dilakukan dengan menggunakan ONPG sebagai substratnya dan kadar protein diukur dengan menggunakan metode Lowry. Karakterisasi enzim meliputi pH, suhu dan waktu inkubasi optimum dari enzim β-galaktosidase yang diperoleh. Isolat bakteri termofilik sumber air panas Gedong Songo memiliki sifat gram negatif dan berbentuk batang. Hasil karakterisasi menunjukkan bahwa kondisi optimum enzim β-galaktosidase isolat bakteri termofilik sumber air panas Gedong Songo dengan substrat ONPG adalah pada suhu 63 oC, pH 6,2 dan waktu inkubasi 30 menit. Aktivitas spesifik tertinggi pada kondisi optimum tersebut didapatkan pada F4 (60-80 %) yaitu 44,145 Unit/mg protein.