ISOLASI, FRAKSINASI DAN AMOBILISASI ENZIM L-ASPARAGINASE DARI BAWANG MERAH (Allium ascalonicum L)

Abstract

L-asparaginase merupakan enzim hidrolase yang memiliki peranan penting dalam bidang kesehatan khususnya pengobatan penyakit kanker. Enzim L-asparaginase ini berperan mengkatalisis reaksi hidrolisis L-asparagin menjadi asam aspartat dan amonia melalui pemutusan ikatan amida. Asparagin merupakan asam amino yang diperlukan oleh sel kanker untuk tumbuh dan berkembang sehingga apabila ia terhidrolisis perkembangan sel kanker akan terhambat. L-asparaginase banyak terdapat di dalam bawang merah (Allium ascalonicum L) dan belum banyak dimanfaatkan sebagai obat terutama obat kanker. Oleh karena itu perlu dilakukan isolasi, fraksinasi dan amobilisasi enzim L-asparaginase dari salah satu sumber utamanya, yakni bawang merah. Isolasi enzim L-asparaginase dilakukan dengan cara ekstraksi dan sentrifugasi. Pemurnian ekstrak enzim ini dilakukan dengan (NH4)2SO4 dan dialisis melalui membran selofan. Aktivitas enzim ditentukan dengan metode Nessler menggunakan kurva standar amonium sulfat dalam suasana alkali. Kadar protein ditentukan dengan metode Lowry menggunakan kurva standar BSA. Dari penelitian yang telah dilakukan diperoleh enzim dengan kemurnian tertinggi pada fraksi 20-40 % (F2) yang mempunyai aktivitas spesifik 497,03 Unit/mg, kemurnian ini meningkat 96 kali dibanding ekstrak kasar. Aktivitas enzim (F2) ini optimum pada suhu 37oC, pH 8,4 dan waktu inkubasi selama 50 menit. Enzim L-asparaginase hasil isolasi perlu diamobilisasi untuk penggunaan enzim dengan lebih efisien. Amobilisasi dilakukan dengan menjerat enzim dalam matriks agar-agar yang diuji aktivitasnya pada tiga kali pemakaian enzim amobil. Enzim amobil hasil isolasi efektif pada dua kali pemakaian.