Pengklonan Gen-Gen Yang Diinduksi Oleh Aluminium Pada Kedelai (glycine max [l.] Merryl)

Abstract

Keracunan Aluminium merupakan factor pembatas utama produksi pertanian di Indosnesia. Sebagai salah satu pendekatan untuk menunjang program pemuliaan kedelai terhadap agroekologi tanah masam dengan kelarutan Al tinggi melalui pendekatan molekuler, maka penelitian ini dilakukan dengan tujuan untuk mengisolasi, mengidentifikasi sekaligus mendapatkan gen-gen yang diinduksi oleh aluminium yang terlibat falam sifat toleransi dalam cekaman Al. dengan teknik penapisan diferensial dan penapisan pita (differential display) melalui teknik PCR (Polymerase Chain Reaction) telah berhasil diisolasi dan dirunut beberapa gen yang diinduksi oleh aluminium pada kedelai galur lumut dengan cekaman 0.8 mM Al selama 24 jam melalui pembuatan pustaka cDNA. Dengan teknik penapisan difernsia telah diisolasi 5 klon gen masing-masing dinamai gmali1, gmali14, gmali20, gmali49, dan gmali 50 (gmali=Glycine max aluminium indoced) sedangkan melalui penapisan pita dengan teknik PCR menghasilkan 1 klon sapali untuk soybean amynolasil peptidase aluminium indoced. Klon-klon gen tersebut ada yang menjadikan : ATPase- proton Membran Plasma (gmali1, terdaftar di bank gen dengan nomor akses AF091303)-yang mengatur perbedaan konsentrasi H+ antara diluar dan didalam sel; peptidase aminoasil (sapali,terdaftar di bank gen dengan nomor akses AF091304)-yang mempunyai aktifitas protease; Histone” H3 (gmali14)-berperan penting dalam proses pembelahan sel; Catalase (gmali20)-berfungsi sebagai antioksidan; Dhydrogenase NADH (gmali49); dan Auxin indiced protein (gmali50)-yang mengindikasikan adanya peran auksin dalam proses toleransi aluminium. Studi expresi klon gen pada taraf aluminium yang toksik untuk Escherichia coli, menunjukan adanya indikasi sifat toleransi dari semua klon gen dlam mendetoksifikasi Al, sehingga Escherichia coli tetap tumbuh normal selama 48 jam