Isolasi serta penentuan aktifitas spesifik Tirosinase dari jamur Merang dan Kentang.

Abstract

Telah dilakukan isolasi dan penentuan aktivitas spesifik Tirosinase dari jamur merang & kentang. Sebanyak 500 g jamur diblender dan ditambahkan aseton 300 mL sedikit demi sedikit sampai homogen, disaring dan dilakukan fraksinasi dengan (NHA) ,S0A secara bertingkat Fl (0-10 %), F2 ( 10-20 % ), F3 ( 20-80 % ) dan F4 ( 30-60 % ) ke dalam supernatan, kemudian dipisahkan. Endapan yang ada ditambah buffer fosfat 0,05 M pH 6,8 dan didialisis selama 12 jam lalu ditentukan unit aktivitas dan kadar protein maka diperoleh nilai aktivitas spesifik. Demikian juga untuk kentang. Untuk uji aktivitas dengan substrat L - Tirosin yang menghasilkan dopakrom maka unit aktivitas diukur dengan Spektrofotometer UV-Vis pada panjang gelombang 475 nm, dan penentuan kadar protein ditentukan dengan metode Lowry. Hasil penelitian menunjukkan bahwa aktivitas spesifik Tirosinase dari jamur merang untuk ekstrak kasar 4,595 U/mg, Fl (0-10 %) 5,894 U/mg, F2 (10-20 %) 6,014 U/mg, F3 (20-30 %) 5,618 U/mg dan F4 ( 30-60 % ) 5,425 U/mg. Adapun untuk kentang Ekstrak Kasar 4,289 U/mg, Fl ( 0-10 % ) 5,268 U/mg, F2 ( 10-20 % ) 5,576 U/mg, F3 ( 20-30 % ) 5,570 U/mg dan F4 ( 30-60 % ) 5,817 U/mg. Dari penelitian ini dapat disimpulkan aktivitas spesifik Tirosinase dari jamur merang lebih besar dari pada aktivitas aktivitas spesifik Tirosinase dari kentang. An isolation and determination of Tyrosinase specific activity of rice straw mushroom and potato. A number up mushroom about 500 g which were blended, then 300 mL aceton term by term added until homogeneus reached filtered and frationated by (NH )2S0in stages which are Fl (0-10 %), F2 (10-20 %), F3 (20-Z0 % and F4 (30-60 %) into then they got seperatRd. The resulted sediment added by buffer phosfat 0,05 M pH 5,8 and by 12 hours dialiting then appointed its unit activity and protein degree so that the specific activity obtained, so did the potato. The activity test by L-Tyrosin as substrat which produces dopakrom, its unit activity measured by Spectrofotometer UV-Vis at 475 nm wave length and the protein degree appointed by Lowry methods. From the research result obtained that Tyrosinase Specific Activity of the rice straw mushroom is : The coarse extract 4,595 U/mg, Fl (0-10 %) 5,894 U/mg, F2 (10-20 %) 6,014 U/mg, F3 ( 20-30 % ) 5,618 U/mg and F4 ( 30-60 % ) 5,425 U/mg and specific activity of the potato is : The coarse 4,289 U/mg, Fl ( 0-10 % ) 5,268 U/mg, F2 ( 10-20 % ) 5,576 U/mg, F3 ( 20-30 % ) 5,570 U/mg and F4 ( 30-60 % ) 5,817 U/mg. To sum up from this research that Tirosinase Spesipic Activity of rice straw mushroom more than Tirosinase Spesipic Activity of potato. iv